Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
1.1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ТОЧНОСТЬ
Биологические методы анализа применяют для количественного определения таких субстанций и препаратов, активность которых не может быть корректно оценена при помощи химических или физических методов анализа. Везде, где возможно, в основу количественных определений положен принцип сравнения со стандартным препаратом, с тем, чтобы определить какое количество анализируемой субстанции даст такой же биологический эффект как определенное количество (Единица) стандартного препарата. Существенным условием проведения таких биологических количественных определений является то, что анализ стандартного препарата и исследуемой субстанции должен быть выполнен в одно и тоже время и при идентичных условиях.
Для некоторых количественных определений (например, определения титра вируса) активность испытуемого образца не выражается относительно стандарта. Такой тип количественного определения рассмотрен в Разделе 4.5.
Любая оценка активности, полученная в ходе биологического количественного определения включает случайную ошибку, обусловленную свойственной биологическим реакциям изменчивостью и, если это возможно, следует провести вычисление ошибки, результатов каждого количественного определения, даже в случае использования официального метода определения. В этой связи ниже приведены методы планирова-
ния количественных определений и вычисления их ошибок. Каждый раз, перед тем как остановиться на том или ином статистическом методе, следует провести предварительное исследование с определенным числом повторений, чтобы убедиться в применимости этого метода.
Доверительный интервал активности характеризует точность, с которой была оценена активность при количественном определении. Он рассчитывается исходя из плана эксперимента и объема выборки. При биологических количественных определениях обычно выбирается 95% доверительный интервал. Для расчета границ этого интервала применяются методы математической статистики, с тем, чтобы гарантировать утверждение, что существует 95% вероятность того, что действительное значение активности находится в данном интервале. Является ли эта точность приемлемой для Фармакопеи, зависит от требований, установленных в частной статье на конкретный препарат.
Термины «среднее» и «стандартное отклонение» используются в данном разделе в соответствии с их определением в большинстве руководств по биометрии.
Термины «заявленная активность» или «активность, указанная в маркировке», «установленная активность», «предполагаемая активность», «отношение активностей» и «рассчитанная активность» используются в данном разделе для обозначения следующих понятий:
- «заявленная активность» или «активность, указанная в маркировке»: для готового препарата - номинальное значение, установленное на основании известной активности исходного материала; для исходного материала - активность, установленная производителем;
- «установленная активность» - активность стандартного препарата;
- «предполагаемая активность»: временно установленная активность испытуемого препарата, на основании которой рассчитываются дозы, которые были бы эквивалентны дозам используемого стандартного препарата;
- «отношение активностей» испытуемого препарата; отношение равноактивных доз стандартного препарата и испытуемого препарата в условиях количественного определения;
- «рассчитанная активность» - активность, рассчитанная на основании данных количественного определения.
В разделе 9 (глоссарий символов) приведены наиболее важные, используемые в данной главе символы. Если в тексте используется символ, не приведенный в этом разделе, или символ используется в другом значении, то его определение дается в той части текста.
2. РАНДОМИЗАЦИЯ И НЕЗАВИСИМОСТЬ КОНКРЕТНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Применение различных методов воздействий к различным экспериментальным объектам (животные, пробирки и т.д.) должно быть осуществлено определенным строго случайным образом. Любой другой выбор экспериментальных условий, который преднамеренно не учитывается в плане эксперимента, также должен быть выполнен случайным образом. Например, выбор размещения боксов в лаборатории и порядок проведения исследований. В частности, группа животных, получающих одинаковую дозу какого-нибудь препарата, не должна одновременно подвергаться исследованию (в то же самое время или в том же самом месте), до тех пор, пока не будет весомых доказательств того, что источник вариации (например, между временем или между положениями) является незначительным. Рандомизация может быть осуществлена с использованием компьютера при помощи встроенной функции случайных чисел. Каждый раз,
после запуска программы аналитик должен убедиться, что генерируется новая последовательность случайных чисел.
Препараты, назначаемые каждому экспериментальному объекту, должны быть настолько независимы, насколько это возможно. В пределах каждой экспериментальной группы, разведения, назначенные каждой группе, должны быть не просто разведениями одной и той же дозы, но и должны быть приготовлены индивидуально. Без выполнения данного условия, вариабельность, свойственная препарату, не будет полностью представлена в дисперсии ошибки эксперимента. В результате будет недооценена не-исключенная погрешность, что может привести к:
